小鼠B細(xì)胞分選試劑盒通過陰性分選法從小鼠脾臟、淋巴結(jié)或骨髓細(xì)胞中分選B細(xì)胞。原理是選用不同的生物素(Biotin)標(biāo)記單克隆抗體對非目標(biāo)細(xì)胞(非B 細(xì)胞)進行標(biāo)記,然后通過鏈霉親和素(Streptavidin)標(biāo)記的磁珠對非目標(biāo)細(xì)胞進行分離,從而達到小鼠B細(xì)胞分選的目的。
產(chǎn)品特點:
高純度:分選后小鼠B細(xì)胞純度可達97.8%。
高活性:可獲得無抗體標(biāo)記的功能良好的小鼠B細(xì)胞。
操作簡捷:無需分離柱,搭配磁性分離器25分鐘即可完成分選操作。
測評數(shù)據(jù)
1. 細(xì)胞純度分析:
用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)從C57BL/6小鼠的骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞。分選前后的細(xì)胞用FITC anti- mouse CD3抗體(克隆號145-2C11)和APC標(biāo)記的anti-mouse CD19抗體(克隆號6D5)染色后進行流式細(xì)胞分析。如圖1所示,骨髓細(xì)胞分選前后B細(xì)胞純度分別為24.6%和95.8%;脾細(xì)胞分選前后B細(xì)胞純度分別為62.9%和97.8%。
圖1. 流式檢測分選前后B細(xì)胞純度
2. 細(xì)胞活率分析:
用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)從C57BL/6小鼠的骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞。分選前后的細(xì)胞用7-AAD染色后進行流式細(xì)胞分析。如圖2所示,骨髓細(xì)胞分選前活細(xì)胞比例為84.3%,分選后活細(xì)胞比例為92.0%。脾細(xì)胞分選前活細(xì)胞比例為84.6%,分選后活細(xì)胞比例為88.7%。
圖2. 流式檢測分選前后B細(xì)胞活率
3. 細(xì)胞功能學(xué)檢測:
用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)從C57BL/6小鼠脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞,加入LPS刺激24小時后,通過流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面活化分子的表達情況。如圖3所示,LPS刺激可顯著增強B細(xì)胞膜表面CD69,CD80和CD86的表達水平。
圖3. LPS刺激后B細(xì)胞膜表面活化分子表達上調(diào)
4. 競品試劑盒性能對比:
對比BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)和競品B細(xì)胞分選試劑盒分選得到的B細(xì)胞的純度和活率。
(1)從C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞和脾臟細(xì)胞中分選B細(xì)胞,分選前后的細(xì)胞用 FITC標(biāo)記的anti-mouse B220 抗體(克隆號RA3-6B2)標(biāo)記后進行流式細(xì)胞分析。如圖4所示,使用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)分選得到的B細(xì)胞純度高于競品對照組。
圖4. BEAVER試劑盒與對照試劑盒分選小鼠B細(xì)胞純度比較
(2)分別使用小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)和競品B細(xì)胞分選試劑盒從骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞,比較兩組B細(xì)胞的活率。如圖5所示,BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒(陰選)分選得到的B細(xì)胞活率與競品對照組相當(dāng)。
圖5. BEAVER試劑盒與對照試劑盒分選小鼠B細(xì)胞活率比較