小鼠B細(xì)胞分選試劑盒通過陰性分選法從小鼠脾臟、淋巴結(jié)或骨髓細(xì)胞中分選B細(xì)胞。原理是選用不同的生物素（Biotin）標(biāo)記單克隆抗體對(duì)非目標(biāo)細(xì)胞（非B 細(xì)胞）進(jìn)行標(biāo)記，然后通過鏈霉親和素（Streptavidin）標(biāo)記的磁珠對(duì)非目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行分離，從而達(dá)到小鼠B細(xì)胞分選的目的。

產(chǎn)品特點(diǎn)：

高純度：分選后小鼠B細(xì)胞純度可達(dá)97.8%。

高活性：可獲得無抗體標(biāo)記的功能良好的小鼠B細(xì)胞。

操作簡(jiǎn)捷：無需分離柱，搭配磁性分離器25分鐘即可完成分選操作。

測(cè)評(píng)數(shù)據(jù)

1. 細(xì)胞純度分析：

用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）從C57BL/6小鼠的骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞。分選前后的細(xì)胞用FITC anti- mouse CD3抗體（克隆號(hào)145-2C11）和APC標(biāo)記的anti-mouse CD19抗體（克隆號(hào)6D5）染色后進(jìn)行流式細(xì)胞分析。如圖1所示，骨髓細(xì)胞分選前后B細(xì)胞純度分別為24.6%和95.8%；脾細(xì)胞分選前后B細(xì)胞純度分別為62.9%和97.8%。

圖1. 流式檢測(cè)分選前后B細(xì)胞純度

2. 細(xì)胞活率分析：

用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）從C57BL/6小鼠的骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞。分選前后的細(xì)胞用7-AAD染色后進(jìn)行流式細(xì)胞分析。如圖2所示，骨髓細(xì)胞分選前活細(xì)胞比例為84.3%，分選后活細(xì)胞比例為92.0%。脾細(xì)胞分選前活細(xì)胞比例為84.6%，分選后活細(xì)胞比例為88.7%。

圖2. 流式檢測(cè)分選前后B細(xì)胞活率

3. 細(xì)胞功能學(xué)檢測(cè)：

用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）從C57BL/6小鼠脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞，加入LPS刺激24小時(shí)后，通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表面活化分子的表達(dá)情況。如圖3所示，LPS刺激可顯著增強(qiáng)B細(xì)胞膜表面CD69，CD80和CD86的表達(dá)水平。

圖3. LPS刺激后B細(xì)胞膜表面活化分子表達(dá)上調(diào)

4. 競(jìng)品試劑盒性能對(duì)比：

對(duì)比BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）和競(jìng)品B細(xì)胞分選試劑盒分選得到的B細(xì)胞的純度和活率。

（1）從C57BL/6小鼠骨髓細(xì)胞和脾臟細(xì)胞中分選B細(xì)胞，分選前后的細(xì)胞用 FITC標(biāo)記的anti-mouse B220 抗體（克隆號(hào)RA3-6B2）標(biāo)記后進(jìn)行流式細(xì)胞分析。如圖4所示，使用BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）分選得到的B細(xì)胞純度高于競(jìng)品對(duì)照組。

圖4. BEAVER試劑盒與對(duì)照試劑盒分選小鼠B細(xì)胞純度比較

（2）分別使用小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）和競(jìng)品B細(xì)胞分選試劑盒從骨髓細(xì)胞和脾細(xì)胞中分選B細(xì)胞，比較兩組B細(xì)胞的活率。如圖5所示，BeaverBeads? 小鼠B細(xì)胞分選試劑盒（陰選）分選得到的B細(xì)胞活率與競(jìng)品對(duì)照組相當(dāng)。

圖5. BEAVER試劑盒與對(duì)照試劑盒分選小鼠B細(xì)胞活率比較

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